非接觸式超聲波細胞破碎儀
非接觸式超聲波細胞破碎儀 Lawson98-III用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。帶消音壓緊裝置,可選配DL-1510型低溫冷卻液循環機。
非接觸式全自動超聲破碎儀也稱非接觸式超聲波破碎儀常用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。帶消音壓緊裝置尤其是應用于腺病毒的微粒釋放,除適合制備高效價的重組腺病毒外,還可以制備病毒DNA,DNA終端蛋白化合物,同時是土壤樣品制備的理想儀器。已經成為CHIP(染色質免疫共沉淀)研究平臺不可缺少的標準化工具。非接觸式超聲波細胞粉碎機又稱超聲波細胞粉碎儀適用于具有特殊需要的反應體系,同傳統接觸式超聲法相比在安全性、精密度、反應效率、反應邊界條件和反應均勻度層面均表現突出的優勢。非接觸式超聲波細胞粉碎機用途廣泛,主要針對細胞的破碎、裂解和細胞內容物顆粒的釋放。
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LAWSON08-III非接觸式超聲波粉碎機,也叫杯式破碎,用于無菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細胞。適于ChP、ChP-seq、RNA-seq以及染色質剪切 和DNA剪切(用于二代測序)。專為二代測序DNA樣本與染色質免疫共沉淀實驗樣本前處理量身訂做,相比傳統的探頭接觸式超聲波細胞粉碎機,非接觸式樣品可在密封容器下進行破碎,不產生感染性飛霧,超聲波探頭與樣品不接觸,避免交叉污染。非接觸式超聲波粉碎機可獲得傳統超聲方式無可比擬的質量、效率和安全性。
一次可同時檢測多個樣品,實驗效率高;無磨損,掉渣現象,各樣品均在單獨的全封閉試管中,避免交叉污染;可選配冷卻水循環系統,便于樣品在4℃水浴超聲波,能量分布均勻,超聲作用完全;超聲參數設置靈活,實驗步驟標準化,實驗重復性好,結果可靠性高。
逐漸成為ChIP(染色質免疫共沉淀)和DNA剪切研究平臺不可缺少的標準化工具。實驗效率高、結果可靠、重復性佳,最低可處理5ul的樣本,適用珍貴的樣本。
非接觸式超聲波細胞粉碎機工作原理:
非接觸式超聲波細胞粉碎機(超聲波細胞粉碎儀)采用在水槽底部安裝超聲波發生裝置的設計,傳統的探頭超聲波破碎儀,超聲波引起的微流動現象只能在靠近探頭的區域出現,而非接觸式超聲波細胞粉碎機由于在水槽底部安裝了超聲波發生器,使水槽完全處于超聲波的作用范圍內,超聲作用分布廣泛而平衡,降低了泡沫的形成。在實驗過程中,非接觸式超聲波細胞粉碎機自動的連續旋轉離心管則使超聲波的能力分布更為均勻。非接觸式超聲波細胞粉碎機在實驗過程仲,樣品分別置于獨立的全密封離心管中,樣本之間不存在任何交叉污染,避免了氣霧的傳播。
非接觸式超聲波細胞粉碎機優越性:
傳統的探頭超聲波細胞粉碎機,探頭與樣品直接接觸,有金屬離子污染,一次只能處理一個樣品,實驗周期長;對于多個樣品,需要重復使用同一探頭,容易造成樣品交叉污染。由于每次探頭插入樣品的深度不用,每次超聲的能量分布也不盡相同,影響實驗結果的重復性和準確性。此外由于不能采用封閉系統,在超聲過程中產生的氣霧或者泡沫會擴散到環境中,造成潛在的生物危險。非接觸式超聲波細胞粉碎機,一次可同時檢測4-32個樣品,實驗效率高;無需頻繁操作探頭,各樣品均在單獨的全封閉試管中,避免交叉污染;采用4度水浴,超聲波能量分布均勻,超聲作用完全;超聲參數設置靈活,實驗步驟標準化,實驗重復性好,結果可靠性高。
⒈無氣霧浮質產生—增強生物安全性(如分支桿菌、病毒等)
⒉消除了樣品交叉污染的危險
⒊消除了傳統的探頭磨損掉渣現象
⒋可處理多種樣品,樣品處理范圍廣泛
⒌適用于各種標準容器
⒍可用于處理微量樣品,最小到5ul
⒎自動的連續旋轉離心管則使超聲波的能量分布更為均勻
⒏可選配高低溫恒溫水浴槽、按照客戶需求定制各種直徑的Eppendorf管破碎旋轉基座
應用范圍:
⒈DNA片段化
⒉RNA片段化
⒊細菌和細胞破碎
⒋ChIp assay(染色質免疫共沉淀)
⒌高通量測序儀樣本前處理
⒍取膜蛋白
⒎均質,乳化反應
⒏貴重試劑的超聲處理
2018新款非接觸式超聲波破碎儀LAWSON08-II產品優點:
封閉系統,在超聲過程中產生的氣霧或者泡沫會擴散到環境中,造成潛在的生物危險。非接觸式全自動超聲破碎儀,一次可同時檢測4-32個樣品,實驗效率高;無需頻繁操作探頭,各樣品均在單獨的全封閉試管中,避免交叉污染;超聲波能量分布均勻,超聲作用完全;超聲參數設置靈活,實驗步驟標準化,實驗重復性好,結果可靠性高。
型號 | Lawson98-III |
頻率 | 19.5-20.5KHz |
功率 | 1200W |
功率調節范圍 | 450--1200W連續可調 |
時間控制精度 | ±1%任意設定 |
工作次數設定 | ±1%任意設定 |
超聲時間設定 | 1—99次,數碼顯示 |
間隙時間設定 | 1—99次,數碼顯示 |
變幅桿末端直徑 | Φ30 |
破碎容量 | (0.1-2ml)×4 |
占空比 | 1-99% |
電源 | 220/110V 50Hz/60Hz |
工作環境 | 0--32℃,RH80,760±30mmHg |
換能器組件約 | 4.5kg |
換能器重量 | 6kg |
發生器尺寸 | 140×330×210mm |
超聲波發生器 | 一臺 |
振動系統(換能器組件) | 一只 |
管子 | 四根 |
十字夾(在隔音箱內) | / |
試管夾(在隔音箱內) | 一只 |
電源線 | 一根 |
專用扳手(用于拆卸變幅桿) | / |
保險絲 | 四只 |
使用說明書 | 一份 |
合格證 | 一張 |
保修卡 | 一份 |
細胞破碎的方法:
一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環狀隙噴射到靜止的撞擊環上,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。
這是一種溫和的、徹底破碎細胞的較理想的方法。
3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變 。
有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。
使用前注意事項:
1.根據所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應超過10秒;
3.使用前準備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。